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凝膠滲透色譜儀器的基本結(jié)構(gòu)和原理

更新時(shí)間:2023-02-09      點(diǎn)擊次數(shù):1250

       1965年美國(guó)Waters公司從陶氏化學(xué)John C. Moore 獲得凝膠滲透色譜(GPC)技術(shù)的授權(quán),生產(chǎn)出了第一臺(tái)商業(yè)化的凝膠滲透色譜儀GPC-100。自此,近幾十年來(lái)市場(chǎng)上陸續(xù)出現(xiàn)了各種型號(hào)的凝膠滲透色譜儀,目前市場(chǎng)上已有多種型號(hào)的兩用或多用凝膠滲透色譜儀,除Waters公司外,島津、Agilent、Bio-Rad、TOSOH、PE等多種品牌的凝膠滲透色譜儀出售。


        隨著液相色譜技術(shù)的不斷發(fā)展和進(jìn)步,高壓輸液泵、凝膠填料、檢測(cè)器以及計(jì)算機(jī)技術(shù)的發(fā)展壯大,凝膠滲透色譜儀的基本結(jié)構(gòu)也不斷的得到強(qiáng)化,準(zhǔn)確、快速和自動(dòng)化使它得到實(shí)驗(yàn)使用人員的信賴(lài),得到越來(lái)越廣泛的應(yīng)用。下面簡(jiǎn)單介紹一下凝膠滲透色譜儀的基本結(jié)構(gòu)和基本原理。

        凝膠滲透色譜儀一般是由溶劑貯存器、過(guò)濾脫氣裝置、高壓輸液泵、進(jìn)樣裝置、色譜柱及柱前過(guò)濾器、檢測(cè)器、自動(dòng)樣品收集裝置、記錄儀和自動(dòng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)等部分組成。


  1. 溶劑貯存器和過(guò)濾脫氣裝置

           溶劑貯存器主要是用來(lái)貯存一定體積的流動(dòng)相,貯存過(guò)程不得與溶劑發(fā)生化學(xué)反應(yīng),它的材質(zhì)一般是玻璃、不銹鋼或聚四氟乙烯等耐腐蝕材料。流動(dòng)相溶劑中往往含有一些雜質(zhì)顆粒,如果直接進(jìn)樣使用,勢(shì)必會(huì)造成色譜柱或泵系統(tǒng)堵塞,所以進(jìn)樣前,一般采用0.22um或0.45um的微孔過(guò)濾膜過(guò)濾。另外,流動(dòng)相溶劑可能還會(huì)溶有部分氣體,當(dāng)進(jìn)入泵或色譜柱后,溶劑中的氣體容易產(chǎn)生氣泡,造成泵吸液的誤差和分離效率降低等。因此進(jìn)樣前,也需要對(duì)溶劑脫氣,對(duì)于低沸點(diǎn)或低粘度的溶劑,多采用真空泵抽吸脫氣;對(duì)于沸點(diǎn)高或高粘度的溶劑,則采用加熱到接近溶劑沸點(diǎn)以去除其中的氣體。


2.高壓輸液泵

       高壓輸液泵是凝膠滲透色譜儀器的關(guān)鍵部件,它能把流動(dòng)相溶劑以高壓的形式連續(xù)、穩(wěn)定地送入色譜系統(tǒng),使樣品在色譜柱完成分離過(guò)程。要求溶劑能以較快的速度通過(guò)分離效率很高的柱子。目前多數(shù)輸液泵的最高工作壓力能達(dá)到41160kPa,有的還能高至68600kPa,以至更高。同時(shí),還要脈沖小。因此,為了完成高壓輸液的任務(wù),對(duì)高壓輸液泵一般應(yīng)滿(mǎn)足以下的幾個(gè)要求:

(1)無(wú)脈動(dòng)的恒定流量,寬范圍內(nèi)連續(xù)可調(diào),能連續(xù)供液不間斷;

(2)高的輸液壓力,能直接測(cè)出并顯示壓力和流量大小;

(3)方便更換溶劑;

(4)能方便地實(shí)現(xiàn)程序控制;

(5)耐腐蝕性;

(6)體積小,方便使用維修;


3.進(jìn)樣裝置

        進(jìn)樣裝置是將待分析樣品引入色譜柱的裝置,凝膠滲透色譜進(jìn)樣量從100ul到制備色譜的10ml,要求進(jìn)樣裝置必須有比較寬的進(jìn)樣范圍,重復(fù)性要好;另外進(jìn)樣裝置還要能耐高壓、耐高溫、耐腐蝕;為了適應(yīng)樣品連續(xù)分析和制備純樣的目的,引入自動(dòng)進(jìn)樣裝置是成為了很多客戶(hù)的選擇。目前經(jīng)常使用的進(jìn)樣裝置有注射器式進(jìn)樣裝置和多通閥進(jìn)樣裝置兩種。


4.柱前過(guò)濾器、色譜柱及附件

4.1柱前過(guò)濾器:在泵的出口與色譜柱之間,設(shè)置一個(gè)柱前過(guò)濾器可以防止流動(dòng)相或樣品溶液中的雜質(zhì)顆粒堵塞管路甚至污染色譜柱,雜質(zhì)在色譜柱中的堆積很容易導(dǎo)致柱壓的升高。使用柱前過(guò)濾器,可以有效保護(hù)色譜柱,延長(zhǎng)色譜柱的使用壽命。過(guò)濾器可以拆卸下來(lái)清洗,重復(fù)多次使用。

4.2色譜柱:凝膠滲透色譜柱是整個(gè)GPC儀的核心,是樣品分離的關(guān)鍵。它主要由柱管、凝膠填料、密封環(huán)、過(guò)濾板及螺帽等部件組成。依據(jù)GPC的特點(diǎn),色譜柱理應(yīng)具備柱效高、耐高溫高壓、耐腐蝕、柱內(nèi)死體積小等,因此對(duì)于色譜柱的填料質(zhì)量和技術(shù)人員的裝柱技術(shù)都有嚴(yán)格的要求。


4.3色譜柱的切換:柱切換技術(shù)是應(yīng)用兩只結(jié)構(gòu)相同,動(dòng)作同步的切換閥,在對(duì)應(yīng)接嘴間接入不同性能或不同規(guī)格的分離柱,根據(jù)需要可以完成更換色譜柱、改變淋洗條件、反沖及餾分切割等,它是配合以微機(jī)控制和智能型凝膠滲透色譜儀的部件。


4.4色譜柱恒溫器裝置:凝膠滲透色譜柱通常需要在較高的溫度下進(jìn)行分離,以提高對(duì)高聚物樣品的溶解度。色譜柱恒溫或升溫有利于降低溶劑粘度和提高祥品溶解度,提高分離度,使保留體積重復(fù)穩(wěn)定。特別在定性分析中,需要精確測(cè)定保留體積的樣品組分的分析,就顯得尤為重要。常見(jiàn)的柱恒溫器有水浴式、電加熱式和恒溫箱式三類(lèi)。其中柱恒溫箱是最為簡(jiǎn)易方便的,能根據(jù)色譜柱的長(zhǎng)度和數(shù)量匹配不同規(guī)格的柱溫箱。


5.檢測(cè)器


        檢測(cè)器是凝膠滲透色譜的核心部件之一。在液相狀態(tài)下流動(dòng)相與樣品的許多物理性質(zhì)十分接近,因此要尋找一種既通用,靈敏度又高的檢測(cè)方法是困難的。檢測(cè)器一般可分為通用型檢測(cè)器和選擇性檢測(cè)器。通用型檢測(cè)器是連續(xù)地測(cè)定溶液中某種整體參數(shù)的變化,如折射率、電導(dǎo)率、介電常數(shù)等,這是任何液體都存在的物理量,因此這類(lèi)檢瀏器適用范圍很廣。但是由于它對(duì)流動(dòng)相本身有響應(yīng),易受環(huán)境溫度和流量波動(dòng)等因素的影響,造成較大的噪聲和漂移,限制了檢測(cè)靈敏度的進(jìn)一步提高,很難適合作痕量分析。選擇性檢測(cè)器僅對(duì)某些被測(cè)樣品或組分響應(yīng)靈敏,而對(duì)流動(dòng)相本身沒(méi)有響應(yīng)或響應(yīng)甚小,因此檢測(cè)靈敏度就高,受外界環(huán)境影響小。但由于具有選擇性,只對(duì)某些組分化合物有響應(yīng),這就大大地限制了它的應(yīng)用范圍。通常一臺(tái)性能完備的GPC儀,應(yīng)當(dāng)同時(shí)配備有通用型檢測(cè)器和幾種選擇性檢測(cè)器。


6.記錄及自動(dòng)數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)


        由檢測(cè)器輸出的信號(hào),需記錄儀來(lái)記錄出色譜圖。通常色譜使用的記錄儀為帶式記錄儀,分單筆式和雙筆式兩種。對(duì)只使用一個(gè)檢測(cè)器的分析,可用單筆記錄儀;同時(shí)使用兩個(gè)檢測(cè)器時(shí),可采用雙筆記錄儀。


        記錄的色譜圖如果用于組分定量,則可根據(jù)峰的保留時(shí)間和峰面積或峰高進(jìn)行定性和定量。儀器對(duì)記錄器的要求是響應(yīng)速度快,其全量程筆速為≤1S,并應(yīng)與檢測(cè)器的輸出相匹配。根據(jù)GPC分析的特點(diǎn),為了同時(shí)能記錄檢測(cè)器的輸出信號(hào)和泵壓變化的信號(hào)或兩個(gè)檢測(cè)器輸出信號(hào),以及實(shí)現(xiàn)記錄器與進(jìn)樣器同步,經(jīng)常選用雙筆、多量程且具備遙控裝置的記錄器來(lái)適應(yīng)分析工作的需要。


        現(xiàn)代高效GPC儀多采用輸出接口方式實(shí)現(xiàn)與色譜數(shù)據(jù)處理系統(tǒng)聯(lián)機(jī)。目前主要有專(zhuān)用的色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)和通用型的微處理機(jī)(配備有色譜程序)兩種類(lèi)型。色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)是一種具備打印、繪圖、積分運(yùn)算等多功能的簡(jiǎn)易型裝置,其結(jié)構(gòu)主要由微處理器(CPU)、存儲(chǔ)器、輸入和輸出裝置等部件構(gòu)成。利用特定的色譜分析程序,可用鍵盤(pán)來(lái)編制運(yùn)行程序和分析條件。在色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)接受檢測(cè)器的輸出模擬信號(hào)后,經(jīng)處理轉(zhuǎn)換為數(shù)字值,并將所判的色譜峰數(shù)字信息,進(jìn)行貯存和運(yùn)算處理,最后用高速繪圖打印裝置完成繪圖和打印報(bào)告。




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